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miRNA模拟物

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miRNA模拟物(miRNA mimics)


化学合成的miRNA mimics是双链RNA分子,转染至细胞后模拟内生miRNA发挥作用。  


1. miRNA mimics的设计合成 


对于瞬时转染miRNA mimics试验,化学成的miRNA mimics操作简便,模拟内生的miRNA,容易获得高水平的miRNA上调结果,特异性强,转染效率高。艾博思经过专业化的设计团队严格的设计的miRNA mimics大大提高专一性。


A) 即用型化学合成, miRNA mimics均由HPLC纯化,100%出去尚未配对的单链。

B)提供现有miRBase数据库中所有人、小鼠、大鼠、病毒miRNA的mimics。

C)荧光标记的miRNA mimics通过荧光标记可以示踪,可以检测转染的效率,以及一些客户特殊的科研需求。

D)提供客户定制mimics合成服务。

 


2. miRNA mimics转染优化 


由于miRNA mimics是进入细胞后才能起作用,因此如何高效的将miRNA mimics转入细胞是成功的关键步骤。为了使得RNAi试验获得最大化的感染效率,利用艾博思的专业的转染技术,针对多种真核生物细胞进行转染参数的细致优化。艾博思利用miRNA mimics荧光标记的阴性对照对于转染效率进行优化,直观可靠。



3. miRNA mimics效果检测 


A.对于已知靶标的基因,或者预测靶标的基因。

通过Western blot方法检测蛋白水平的基因敲减效果或者通过带有miRNA结合位点的luciferase荧光素酶报告基因载体来分析。

B.对于未知靶标的基因

通过芯片进行筛查或通过miRNA array,gene array根据客户实际通量来进行筛查

 


客户提供


  • 选择的细胞系和详细的细胞培养的操作步骤

  • 选择的miRNA的Sanger ID或者名称;靶基因cDNA的序列号(GeneID,Accession Number,或者客户指定的特异序列)

  • 高质量的抗体(如果需要进行Western blot检测)

 


miRNA mimics的应用


  • 利用miRNA mimics模拟内生miRNA活性来研究gain-of-function效应

  • 筛选调控基因表达和影响细胞发育过程的miRNAs

  • 深入研究miRNA在一些生物过程中的作用,如细胞的发育、增殖、分化和凋亡

  • 发现和验证内源性的miRNA target

 


作用原理


化学合成的 miRNA mimics是双链RNA分子,转染至细胞后模拟内生miRNA发挥作用。理论上是增强miRNA调控作用。双链的设计稳定。



对照设置


阴性对照使用mimics negative control ,此序列经过严格的实验验证与已知哺乳动物基因无同源性,如果使用报告载体用于分析,与载体一起转染即可。


阳性对照客户指定Paper公开发表的已经确认与靶基因表达有直接关联的miRNA.进行该miRNA mimics转染。





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