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（A）CRISPR / Cas9系统

Cas9内切酶来源于II型CRISPR系统。化脓性链球菌(SpCas9)是第一个为哺乳动物基因组编辑Cas9酶。当与gRNA 序列结合后,这些酶可以在特定位点上进行基因组双链断裂。因其简捷性,特异性以及高效性，CRISPR / Cas9系统在基因组编辑中广泛使用。

（B）sgRNA递送策略

1）Cas9蛋白和sgRNA

2）编码Cas9的mRNA和sgRNA共转染

3）Cas9质粒与sgRA共转染

4）将sgRNA转染进入Cas9稳转细胞系中

sgRNA方法优越性

1. 无需退火crRNA：tracrRNA

更高的效率和更少的实验室时间

2. 体内稳定性更好

双链形式与Cas9核酸酶结合

3.高性价比

高度可扩展，可进行大量实验

4.无DNA干扰

没有将外源DNA整合入细胞系的风险

5. 单个寡核苷酸

收到产品即可进行转染

6. 针对SpCas9优化

经过优化骨架适用于SpCas9

7. 避免免疫干扰反应

传统转录方法获得的sgRNA容易产生免疫干扰反应

8. 化学修饰降低脱靶和增强稳定性

3个碱基硫代和甲氧基修饰增强稳定性并降低脱靶效应

为什么化学合成sgRNA优于体外转录sgRNA

定制高通量筛选模式

通过预制的sgRNA array可以进行高通量的sgRNA筛选

优化方案增强编辑效率

研究显示，单条sgRNA涵盖crRNA和tracrRNA两条的序列和功能，无需退火，更稳定，具有更高的编辑效率。化学修饰sgRNA可以避免体外转录获得sgRNA可能引起免疫反应，无法添加稳定性修饰和批次间一致性差等问题。

艾博思提供高效的sgRNA合成

艾博思生物提供序列100%正确，交付量100%保证的sgRNA合成服务，基于核酸化学合成平台，提供毒性低、更稳定、编辑效率高的化学合成sgRNA，是CRISPR/Cas9基因编辑的绝佳选择，为您的项目提高效率、节省时间人力成本。