miRNA抑制物(miRNA inhibitors)
产品介绍
化学合成的miRNA inhibitors是单链RNA分子,转染至细胞后特异性抑制miRNA功能,可以结合到成熟的miRNA上、干扰miRNA的生成、阻止miRNA加工、或者阻止其从核内转运到胞浆发挥作用。
1.miRNA inhibitors的设计合成
A) 即用型化学合成,miRNA inhibitors 2’Ome修饰单链分子;
B)提供现有miRBase数据库中所有人、小鼠、大鼠、病毒miRNA的inhibitors;
C)荧光标记的miRNA inhibitors 通过荧光标记可以示踪,可以检测转染的效率,以及一些客户特殊的科研需求;
D)提供客户定制inhibitors合成服务。
2. miRNA inhibitors 转染优化
由于miRNA inhibitors是进入细胞后才能起作用,因此如何高效的将miRNA inhibitors转入细胞是成功的关键步骤。艾博思利用miRNA inhibitors荧光标记的阴性对照对于转染效率进行优化,直观可靠。
3. miRNA inhibitors效果检测
A.对于已知靶标的基因,或者预测靶标的基因。
通过Western blot方法检测蛋白水平的基因敲减效果或者通过带有miRNA结合位点的luciferase荧光素酶报告基因载体来分析。
B.对于未知靶标的基因
通过芯片进行筛查或通过miRNA array、gene array根据客户实际通量来进行筛查
客户提供
● 选择的细胞系和详细的细胞培养的操作步骤
● 选择的miRNA的Sanger ID或者名称;靶基因cDNA的序列号(GeneID,Accession Number,或者客户指定的特异序列)
● 高质量的抗体(如果需要进行Western blot检测)
miRNA inhibitors的应用
● 利用miRNA inhibitors模拟内生miRNA活性来研究Loss-of-function效应
● 筛选调控基因表达和影响细胞发育过程的miRNAs
● 深入研究miRNA在一些生物过程中的作用,如细胞的发育、增殖、分化和凋亡
● 发现和验证内源性的miRNA target
作用原理
化学合成的miRNA inhibitors是单链RNA分子,转染至细胞后特异性抑制miRNA功能,可以结合到成熟的miRNA上、干扰miRNA的生成、阻止miRNA加工、或者阻止其从核内转运到胞浆发挥作用。理论上是抑制miRNA调控作用。单链的2’甲氧设计增强稳定性。
对照设置
阴性对照:使用inhibitors negative control ,此序列经过严格的实验验证与已知哺乳动物基因无同源性,如果使用报告载体用于分析,与载体一起转染即可。
阳性对照:客户指定Paper公开发表的已经确认与靶基因表达有直接关联的miRNA,进行该miRNA inhibitors转染。
